• 常用的电泳缓冲液
  • 点击数:  发表日期:2008-1-2
  • 缓冲液
    使用液
    浓贮存液(每升)

    tris-乙酸(TAE)
    1×:0.04mol/l tris-乙酸
    50×:242g tris碱

     
    0.001mol/l EDTA
    57.1ml冰乙酸

     
     
    100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

    tris-磷酸(TPE)
    1×:0.09mol/l tris-磷酸
    10×:10g tris碱

     
    0.002mol/l EDTA
    15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

     
     
    40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

    tris-硼酸(TBE)a
    0.5×0.045mol/l tris-硼酸
    5×:54g tris碱

     
    0.001mol/l EDTA
    27.5硼酸

     
     
    20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

    碱性缓冲液b
    1×:50mmol/l naoh
    1×:5ml 10mol/l naoh

     
    1mmol/l EDTA
    2ml 0.5mmol/l EDTA(ph8.0)

    tris-甘氨酸c
    1×:25mmol/l tris
    5×:15.1g tris

     
    250mmol/l 甘氨酸
    94g 苷氨酸(电泳级)(ph8.3)

     
    0.1% SDS
    50ml 10% SDS(电泳级)


    说明:

    ①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。一般都以1×TBE作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。

    ②碱性电泳缓冲液应现用现配。

    ③tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

    2×sds凝胶加样缓冲液:

    100mmol/l tris·HCL(6.8)

    200mmol/l二硫苏糖醇(DTT)

    4%sds(电泳级)

    0.2%溴酚蓝

    20%甘油

    不含DTT的2×sds凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/l贮存液现加于上述缓冲液中。