• 常用抗生素和培养基
  • 点击数:  发表日期:2008-1-2
  • 常用抗生素

    氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)
    溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
    溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
    溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
    卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
    溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
    溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    链霉素(streptomycin)(50mg/ml)
    溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
    溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    四环素(tetracyyline)(10mg/ml)
    溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    常用培养基

    LB培养基
    将下列组分溶解在0.9L水中:
    蛋白胨 10g
    酵母提取物 5g
    氯化钠 10g

    如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
    SOB培养基
    将下列组分溶解在0.9L水中:
    蛋白胨 20g
    酵母提取物 5g
    氯化钠 0.5g
    1 mol/L 氯化钾 2.5ml


    用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
    SOC培养基
    成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。
    TB培养基
    将下列组分溶解在0.9L水中:
    蛋白胨 12g
    酵母提取物 24g
    甘油 4ml

    各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。
    2×YT培养基
    将下列组分溶解在0.9L水中:
    蛋白胨 16g
    酵母提取物 10g
    氯化钠 4ml

    如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
    YPD培养基
    将下列组分溶解在0.9L水中:
    蛋白胨 20g
    酵母提取物 10g
    葡萄糖 20g

    用水补足体积为1L后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。