• 细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术
  • 点击数:  发表日期:2007-12-29
  • 一、固定细胞的染色方法

    1PI单染色法

    方法一

    1.收集细胞(15)×106个,5001000r/min离心5min,弃去培养液。

    2.3ml PBS洗一次。

    3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h

    4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min

    5.400目的筛网过滤1次,5001000r/min离心5min,弃去PBS

    6.1ml PI染液,4℃避光30min

    7.流式细胞仪检测:PI用氩离子激发荧光,激发光波波长为488nm,发射光波波长大于630nm,产生红色荧光,可分析前散射光对侧散射光的散点图及PI荧光的直方图。

    方法二

    1.收集细胞(1×106个),5001000r/min离心5min,弃去培养液。

    2.1ml PBS/FCS洗一次。

    3.5001000r/min离心5minPBS/FCS,加入500μl PBS/FCS500μl的多聚甲醛固定液,轻轻混匀,在4℃下固定