• 293细胞的特性
  • 点击数:  发表日期:2006-5-7
  • 细胞名称
    HEK 293 HEK 293T  (HEK, human embryonic kidney, 人胚肾细胞
    种属
    组织来源
    293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。
    形态特点
    上皮细胞
    致瘤性
    +
    产物或抗原
    大T抗原
    染色体核型
    亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der(1)与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。
    生长特性
    粘附
    文献评价
    293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725]
    表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]
    早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764],现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]
    此细胞系人腺病毒滴度高。
    室温不贴壁,37℃几日后重新贴壁。
    表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793]
    The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
    传代
    293:弃培养基,含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗涤,弃去,加1-2ml消化液室温或37℃消化。
    加入新鲜培养基,吸出,分到新培养皿中。一传二至一传四。
    293T:生长快,通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1:10至1:20稀释,5% CO2条件下培养。
    细胞贴壁疏松,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶过度消化。
    培养基更换
    每2-3天一次
    冻存液
    95%培养基;5%,DMSO;culture medium 95%; DMSO, 5%;
    培养条件
    ATCC培养基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠;10%加热灭活的马血清
    37℃培养